Вектор для быстрого клонирования ПЦР-продуктов pAL2-T, лиофилизат, 25 реакций

Цена по запросу
Категория:

Описание

Векторы pAL2-T и pKAN-T предназначены для быстрого клонирования продуктов ПЦР без предварительной обработки рестриктазами или экзонуклеазами.
Рекомендуемый размер вставки – до 1 000 п.о.

Каждый из векторов представляет собой линеаризованную плазмиду с выступающими фосфорилированными 3′-концевыми тимидинами. Эффективное лигирование ПЦР-продукта в вектор основано на способности Таq-полимеразы и ее аналогов нематрично добавлять на 3′-конец синтезированной цепи ДНК дезоксиаденозин. Таким образом, продукт ПЦР и вектор несут выступающие комплементарные 3′-концевые нуклеотиды А:Т. Наличие таких «липких» концов обеспечивает значительно более высокую эффективность лигирования по сравнению с лигированием «втупую».

Векторы несут гены устойчивости к антибиотикам:

  • pAL2-T – к ампициллину;
  • pKAN-T – к канамицину.

Различная устойчивость существенно облегчает переклонирование ампликонов и последующую работу с клонированными фрагментами ДНК. Возможность смены устойчивости к антибиотику (ампициллин на канамицин, и наоборот) позволяет исключить возможность роста колоний с исходной плазмидой, что упрощает манипуляции при переклонировании фрагментов из ТА-векторов в специализированные вектора. Отказ от обязательной в ряде случаев и трудоемкой стадии очистки продуктов ПЦР/рестрикции через агарозный гель сокращает время клонирования и уменьшает потери ДНК.

Основные свойства векторов pAL2-T и pKAN-T

1. Клонирование ПЦР-продуктов в вектор не требует дополнительной ферментативной обработки;
2. Вектор обеспечивает возможность бело-голубой селекции клонов (по результатам ПЦР-скрининга не менее 90% белых колоний содержат рекомбинантную плазмидную ДНК);
3. Вектор можно использовать для клонирования как индивидуальных ампликонов, так и сложных смесей (например, амплифицированных библиотек кДНК);
4. Возможен отбор рекомбинантных клонов путем ПЦР-скрининга бактериальных колоний с использованием стандартной пары праймеров;
5. Растворённый в воде вектор выдерживает не менее 10-15 циклов размораживания/замораживания без снижения эффективности

Похожие товары

X
X