Описание
Набор Quick-TA предназначен для быстрого клонирования продуктов ПЦР без предварительной обработки рестриктазами или экзонуклеазами. В состав набора входят две фасовки pAL2-T вектора, Quick-TA T4 ДНК лигаза, буферы для быстрого и стандартного лигирования, праймеры для скрининга клонов и секвенирования вставки.
Эффективное лигирование ПЦР-продукта в pAL2-T вектор основано на способности Таq-полимеразы и ее аналогов нематрично добавлять на 3′-конец синтезированной цепи ДНК дезоксиаденозин. Таким образом, продукт ПЦР и pAL2-T вектор несут выступающие комплементарные 3′-концевые нуклеотиды А:Т. Наличие таких «липких» концов обеспечивает значительно более высокую эффективность лигирования по сравнению с лигированием «втупую».
Quick-TA T4 ДНК лигаза хорошо подходит как для «тупого», так и для «липкого» лигирования.
5X Quick ligation буфер предназначен для быстрого (5-15 минут) лигирования одиночных ПЦР-продуктов при комнатной температуре.
10X Overnight ligation буфер предназначен для стандартного лигирования (14-16 часов при 14°C).
