Описание
Набор реагентов БиоМастер ОТ-ПЦР-РВ (2×) содержит 2× буфер для ОТ-ПЦР-РВ, содержащий все необходимые компоненты (за исключением РНК матрицы и праймеров); БиоМастер-микс и Воду, обработанную ДЭПК. Набор предназначен для проведения обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (ОТ-ПЦР РВ) с флуоресцентными зондами одношаговым методом.
В состав БиоМастер-микс входит M-MuLV –RH и HS—Taq ДНК-полимераза в оптимальном соотношении для протекания обеих реакций.
M-MuLV –RH – генетически модифицированная обратная транскриптаза (ревертаза) вируса лейкемии мышей (M-MuLV). Фермент проявляет РНК- и ДНК-зависимую полимеразную активность, но лишен активности РНКазы Н. Ревертаза M-MuLV –RH обладает повышенной термостойкостью и проявляет активность до 50 °С.
HS—Taq ДНК-полимераза представляет собой рекомбинантную Taq ДНК-полимеразу, инактивированную специфическими моноклональными антителами. HS—Taq ДНК-полимераза неактивна при температуре до 70 °С. Активация осуществляется на первом цикле ПЦР при короткой 5-и минутной инкубации при 95 °С. Рекомбинантная HS—Taq ДНК-полимераза обладает 5´-3´ ДНК-зависимой полимеразной активностью и 5’-3’ экзонуклеазной активностью нативной Taq ДНК-полимеразы из Thermus aquaticus. Рекомбинантная HS—Taq ДНК-полимераза идеально подходит для стандартной ПЦР с матрицы до 5 т.п.о.
2× буфер для ОТ-ПЦР-РВ оптимизирован для эффективного протекания как ОТ, так и ПЦР.
