Описание
В состав БиоМастер Экстра-микс входит RNAscribe RT ревертаза, HS—Taq ДНК-полимераза и Pfu ДНК-полимераза в оптимальном соотношении для протекания обеих реакций.
RNAscribe RT – генетически модифицированная обратная транскриптаза (ревертаза) вируса лейкемии мышей (M-MuLV). Фермент проявляет РНК- и ДНК-зависимую полимеразную активность и проявляет оптимальную активность при 50 °С (активна до 60 °С). Фермент способен синтезировать первую цепь кДНК длиной до 9 т.о. и включать модифицированные основания. Его быстрая скорость реакции позволяет выполнять синтез всего за 15 минут, а высокая рабочая температура фермента (до 60 °C) обеспечивает высокий выход и специфичность реакции.
Высокоточную ПЦР осуществляет комбинация из двух высокоочищенных ферментов: высокопроцессивной рекомбинантной HS—Taq ДНК-полимеразы и Pfu ДНК-полимеразы с корректирующей активностью. Смесь полимераз неактивна при комнатной температуре. Для активации ферментов необходим прогрев реакционной смеси при 92-93°С в течение 5 мин.
Сочетание полимераз позволило повысить точность и надежность амплификации в несколько раз по сравнению с Taq ДНК-полимеразой. Совместное использование двух ферментов дает возможность нарабатывать ПЦР-продукты до 9 т.п.о. Продукты, полученные с помощью БиоМастер ОТ-ПЦР–Экстра (2×), преимущественно содержат 3’-dA концы, что может быть использовано при клонировании.
Буфер оптимизирован для эффективного протекания как ОТ, так и ПЦР.
